Sonovitro®FUAuto全自动超声转染系统

Sonovitro是专门针对超声靶向递送实验而设计的超声转染实验装置。仪器主要由超声发生器、自动化传动系统、实验操作平台以及专用孔板等部件和模块组成,旨在提升超声介导基因转染实验的效率。


  • 商品介绍
  • 规格参数

  • Sonovitro®FUAuto的技术应用背景

    现今,基因治疗领域不断取得新的突破,它在肿瘤、心血管系统疾病及中枢神经系统疾病等多种疾病的治疗上有着广阔的应用前景,而其主要障碍并非是缺少理想的目的基因,而是缺乏安全有效的基因递送方法。近年来,超声因具有靶向递送基因至细胞和组织的潜能而备受关注,研究表明,超声辐照可诱发空化效应,使细胞膜通透性增加,有利于大分子物质的胞内递送,且可避免其他转染方法的副作用。超声靶向递送技术Ultrasound Targeted Microbubble Destruction,UTMD可靶向递送特异性基因,已成为一种新型、简便、有效的基因递送方式。


    关于Sonovitro®FUAuto全自动超声转染系统

    Sonovitro®FUAuto是专门针对超声靶向递送实验而设计的超声转染实验装置。仪器主要由超声发生器、自动化传动系统、实验操作平台以及专用孔板等部件和模块组成,旨在提升超声介导基因转染实验的效率。

    Sonovitro®FUAuto采用了超声递送技术,具有安全、高效、便捷、重复性强等优点,适用于临床试验研究中的基因转染Gene Transfection和药物递送Drug Delivery领域中的实验研究。传统的外置超声装置,操作过程中探头直接或间接与细胞接触,容易造成细泡污导致实验失败,且实验不可批量化操作。


    Sonovitro®FUAuto的转染实验操作以卵巢癌细胞(A2780)为例

     

    实验流程

     

    转染前的准备

    1.      细胞铺板 选用处于生长对数期的状态良好的细胞,用胰酶消化,离心;加入完全培养基重悬;进行细胞计数后,以每孔1×105个细胞接种至24孔,继续培养24h。如果细胞是近期复苏的冻存细胞,在转染前至少传代两次。

    2.      微泡准备 制备好所需的微泡(制造商研发团队制备)后,4℃保存。

    3.      质粒准备 选用纯度较高的无内毒素质粒,OD260/OD280≥1.8。

    4.      培养基准备 配置好所需的不同培养基,并确保培养基没有被细菌、真菌或支原体污染。

    转染

    1.      首先将细胞培养板置于光镜下观察细胞状态,包括培养基颜色、细胞形态、细胞密度,若出现污染或状态欠佳,则不对该板细胞进行转染。

    2.      准备好所有的所需物资,放置在超净台内,包括微泡、质粒、培养基、PBS缓冲液、EP管等,避免多次来回走动。

    3.      转染前1小时更换无血清培养基,每孔加入100µl Opti-MEM。

    4.      微泡与质粒准孵育。每孔微泡用量为10 µl,所需质粒量为10µg,吸取微泡与对应质量的质粒混合孵育15min后,加入Opti-MEM培养基,使每孔的转染体系为300µl,继续孵育5min。

    5.      吸去培养板的培养基,用PBS冲洗细胞2次。将微泡质粒混合物加入孔内,轻柔前后摇动培养板使其分布均匀。

    6.      在Sonovitro®FUAuto水槽中加入330ml无菌水,以保证超声声头与孔板之间可以经水完全接触。移动孔板,使目标孔位与探头共圆心。选用超声参数为:频率为1MHz,强度为1.0w/cm2,占空比为20%,辐照时间为1min。每孔辐照后,用无菌纸或纱布擦干孔板底部水分,喷洒酒精后放回培养箱继续培养。

    完成后的操作

    1.      转染后4-6h进行换液。吸弃原有培养基,用PBS洗涤2次,加入完全培养基300µl,继续放回培养箱培养。

    2.      在转染后24h,将培养板置于荧光显微镜下观察荧光表达。

     

    如需咨询或了解实验方案及更详细的实验应用方案,请致电制造商或将需求发送inquiry@sxultrasonic.com获取更多的帮助。